Može se zamrznuti i odmrznuti RIPA pufer 2-3 puta bez gubitka svoje snage sve dok se čuva na ledu tokom upotrebe (20-30 min). Čuvajte pufer zamrznut na -80 stepeni C.
Koliko dugo mogu zadržati RIPA bafer?
1. Ako će se pufer kontinuirano koristiti, preporučuje se da se pufer 10x čuva na 4°C 1-2 sedmice. Duži vremenski period, pufer treba čuvati na -20°C. Alikvotiranje 10x pufera se preporučuje ako se treba izvesti mnogo malih eksperimenata.
Može li se RIPA bafer pohraniti na?
Pripremljeni RIPA pufer treba podijeliti na alikvote i čuvati na −20°C. Dodajte inhibitore proteaze i/ili fosfataze u odmrznuti alikvot prije neposredne upotrebe. Jedan mililitar pufera dovoljan je za lizu približno 5 miliona ćelija. …
Kako čuvate RIPA lizate?
Koristite pripremljene lizate što je brže moguće i čuvajte što je kraće moguće. Čuvajte lizate na -80℃ što je duže moguće. Za lizate koje će trebati dugotrajno čuvati, svježe pripremljene epruvete prebacite u dostupni zamrzivač na -80℃ kako biste spriječili razgradnju.
Kako odmrznuti RIPA tampon?
Nakon uklanjanja konačnog rastvora za ispiranje iz ćelija, dodajte odgovarajuću zapreminu RIPA pufera (1 ml na 0,5 do 5 × 107 ćelija) u ćelijsku peletu, i kratko promešajte ili vorteksirajte da biste potpuno resuspendovali ćelije. Inkubirajte na ledu ili u frižideru (2–8 °C) pet minuta.