Logo bs.boatexistence.com

Kako napraviti imunofluorescenciju?

Sadržaj:

Kako napraviti imunofluorescenciju?
Kako napraviti imunofluorescenciju?

Video: Kako napraviti imunofluorescenciju?

Video: Kako napraviti imunofluorescenciju?
Video: Kako napraviti zabicu od papira 2024, Maj
Anonim

Slijedi pregled različitih koraka protokola indirektnog imunofluorescentnog bojenja

  1. Planiranje eksperimenta i priprema uzoraka. …
  2. Sample Fixation. …
  3. Cell Permeabilization. …
  4. Blokiranje. …
  5. Primarna inkubacija antitijela. …
  6. Sekundarna inkubacija antitijela. …
  7. Protivboj i montaža.

Kako izvodite imunofluorescenciju?

Svi koraci inkubacije se odvijaju na sobnoj temperaturi

  1. Operite ćelije dvaput i pincetom pažljivo stavite pokrovno staklo sa prevrnutim ćelijama u vlažnu komoru.
  2. Popravite sa 4% formaldehida 10 minuta i operite 3 ×.
  3. Permeabilizirajte sa 0,1% TX-100/PBS 15-20 minuta i operite 3 ×.

Kako se koristi imunofluorescencija u ćeliji?

Protokol imunofluorescencije za adherentne ćelije

  1. Sjeme 1–1,5 x104 ćelije po jažici stakalca sa 4 komore u 500 mL medijuma za kulturu. Inkubirajte na 37°C na 5% CO2.
  2. 32-36 sati nakon zasijavanja ćelija, uklonite podlogu za ćelijsku kulturu i isperite ćelije 3 puta koristeći 500 µL 1X PBS.

Šta je primjer imunofluorescencije?

Na primjer, istraživač bi mogao stvoriti primarna antitijela u kozi koja prepoznaju nekoliko antigena, a zatim koristiti bojom spregnuta zečja sekundarna antitijela koja prepoznaju konstantnu regiju kozjih antitijela (" zečja anti-kozja" antitela).

Koja je upotreba imunofluorescentnog bojenja?

Imunofluorescentno (IF) bojenje je široko korištena tehnika u biološkim istraživanjima i kliničkoj dijagnostici IF koristi fluorescentno označena antitijela kako bi otkrila specifične ciljne antigene. Nakon toga slijedi slikanje, to je vrlo direktna tehnika jer nešto možete vidjeti.

Preporučuje se: