Vrtexing neće smicati vašu RNK da bi je učinio neupotrebljivom ako radite nasumično primiranje RT - samo ako želite da klonirate dugu mRNA. Invitrogen tehnička podrška je također ispravna. Hloroform je teži od Trizola i potonuo će na dno epruvete.
Da li je bezbedno vrtložni RNA?
Nemojte vorteksirati Trizol lizate ili uzorke RNK da biste izbjegli smicanje. Nakon ekstrakcije, uvijek držite uzorke RNK na ledu. Ovaj protokol je dizajniran za uzorke lizirane 1mL Trizola u epruveti od 1,5 ili 2mL.
Možete li zagrijati RNA?
Stoga, izbjegavajte visoke temperature ( iznad +65°C) jer one utiču na integritet RNK. Umjesto toga, da biste otopili sekundarne strukture, zagrijte RNK na +65°C 15 minuta u prisustvu denaturirajućih pufera.
Kako resuspendirati RNA pelete?
resuspendirajte svoj pelet sa toplom vodom (40-50 st. celc). inkubirajte na 45 °C 10 min. stavite ih u +4 na 4-6 sati.
Kako precipitirati RNA?
A.
Nakon što je koncentracija soli podešena, RNK se može istaložiti dodatkom 2,5 zapremine etanola ili 1 zapremine izopropanola i temeljnim mešanjem, nakon čega slijedi hlađenje najmanje 15 minuta na -20° C.
